ترسیم نقشه بیان ژن های ابرخانواده adamts12-20و adamtsl1-4 در بافت های مختلف چشم انسان

نقش ماتریکس خارج سلولی (extracellular matrix:ecm) در اختلالات و بیماری های چشمی روز به روز آشکارتر می شود. نقش adamtss و سایر اجزاء ecm مانندltbps ، فیبریلین ها و کلاژن ها در بیماری های مختلف چشمی مانند گلوکوم، اکتوپیا لنتیس، آرتریتیس و دیستروفی قرنیه تاکنون به اثبات رسیده است. از آنجایی که اطلاعات کمی در مورد بیان ژن های ابرخانواده adamts12-20 و adamtsl-1-4در بافت-های مختلف چشم وجود دارد و با توجه به اهمیت این ابرخانواده در اختلالات چشمی، ما در این مطالعه قصد داریم توزیع بیان این ژن ها را در بافت های مهم چشم (شبکه ترابکولار، عدسی، لایه رنگدانه ای شبکیه، لایه ماکولای شبکیه و عصب بینایی) بررسی کنیم. بیان ژن ها نقش کلیدی در شکل گیری ساختار و عملکرد بافت ایفاء می کنند. بنابراین نمایش الگوی بیان ژن های مهم در بافت، شناخت ما را از فیزیولوژی و پاتولوژی آن افزایش خواهد داد. در این مطالعه 5 بافت (شبکه ترابکولار، عدسی، لایه رنگدانه ای شبکیه، ماکولا و عصب بینایی) در 9 چشم از 3 رده سنی، <3، 20-50 و >50، مورد بررسی قرار گرفت. rna بافت ها با استفاده از trizol و طبق دستور ارائه شده توسط کارخانه سازنده استخراج گردید. کیفیّت rna های استخراج شده با استفاده از نسبت باند 28s و 18s مورد بررسی قرار گرفت. سنتز cdna با استفاده ازavian myeloblastosis virus reverse transcriptase(cinnagen) و random hexamers طبق دستورالعمل ارائه شده توسط کارخانه ساخته شد. real time pcr با استفاده از دستگاه corbett 65h0 (corbett research, sidney, australia) و با استفاده از quantifast sybr green pcr kit (qiagen, germantown, md)انجام پذیرفت. cdnaها در سیکل های °c95 به مدت 15 ثانیه،°c55 به مدت 25 ثانیه و °c72 به مدت 25 ثانیه تکثیر شدند. اختصاصیّت محصولات pcr با آنالیز منحنی های ذوب مورد بررسی قرار گرفت. از ژن gapdh به عنوان ژن کنترل برای آزمایشات real time pcr استفاده شد. ژن های adamts15, 17وadamtsl-2, 3, 4 در شبکه ترابکولار، ژن های adamts15, 16, 18 و adamtsl-2, 3, 4 در عدسی، ژن های adamts15, 17,، adamtsl-1, 2, 3, 4 در لایه رنگدانه ای شبکیه، ژن های adamts15, 17, 18، و adamtsl- 2, 3, 4 در ماکولا و ژن های adamts15 و adamtsl-1, 2, 3, 4 در عصب بینایی بیان بالایی را نشان دادند. ما در این مطالعه برای اولین بار نشان دادیم که تعدادی از ژن های این ابرخانواده در چشم بیان می شوند.